柱效损失的可能原因
1.额外的峰展宽。要保证管路的长度和内径都保持zui小。
2.洗脱的平衡时间不够。
3.不正确的洗脱液pH或洗脱液的离子强度。
4.洗脱液中存在不正确离子。
5.固定相污染。
a.高柱压伴随分辨率降低。
1.颗粒物积聚在烧结物或者填充物床上。
(a)样品来源---过滤或离心
(b)洗脱液来源---过滤洗脱液,封闭洗脱液容器。
(c)系统来源---冲洗整个系统管路和泵;安装在线系统过滤器。
2.蛋白质类物质的积聚
(a)微生物在样品中生长。
3.微生物在洗脱液中生长。
b.正常柱压伴随柱效降低
1.有机污染
(a)样品中有脂肪,油脂,脂质。固定相的表面被覆盖。
(b)从样品中带来的不确切的有机物或未正确制备的洗脱液。
(c)在洗脱液制备完成以后带入洗脱液中的非特定有机物,例如在运输时从大气中带来。