色谱柱作为色谱分析系统的核心部件，其选型直接影响分离效率、分析精度及方法开发周期。以下从多个维度阐述选购色谱柱的关键要点：

　　一、明确实验需求与分析目标

　　- 分析目的定位

　　- 定性分析需高分离度与柱效，优先选择理论塔板数高的色谱柱；

　　- 定量分析侧重重复性与稳定性，应选择批次间重现性好的型号；

　　- 制备色谱则需高载样量，推荐大内径(如10mm以上)、大粒径填料的色谱柱。

　　- 样品性质适配

　　- 非/弱极性化合物：反相C18或C8柱；

　　- 强极性化合物：可选正相柱或极性改性反相柱；

　　- 离子型物质：采用离子交换色谱柱；

　　- 生物大分子：需大孔径(≥300Å)的尺寸排阻或专用凝胶柱。

　　二、评估核心性能参数

　　- 物理参数优化

　　- 柱长与内径：常规分析常用150mm×4.6mm，复杂样品可延长至250mm以提高分离度，但需权衡柱压与时间成本；

　　- 填料粒径：5μm适用于常规HPLC，3.5μm以下适配超高效液相(UPLC)，粒径减小可提升柱效但增加背压；

　　- 孔径选择：小分子(<1000Da)适用80–120Å，大分子(如蛋白质)需300Å以上以确保扩散自由度。

　　- 化学性能指标

　　- 硅胶纯度：高纯硅胶可减少金属杂质导致的碱性化合物拖尾；

　　- 键合工艺：单体键合传质快，聚合键合稳定性高；碳覆盖率影响保留能力，高载碳量适合非极性物质；

　　- 封端处理：减少残留硅羟基干扰，改善极性化合物峰形。

　　三、匹配仪器与操作条件

　　- 设备兼容性验证

　　- 液相色谱仪：确认泵的最大耐压是否符合小粒径柱的要求；

　　- 气相色谱仪：须校验进样口密封性与柱温箱控温精度]。

　　- 流动相与pH范围

　　- 硅胶基质柱：标准pH耐受范围为2–8，特殊修饰后可扩展至1–12；

　　- 聚合物柱：宽pH适应性(1–14)，但需注意有机溶剂引起的溶胀问题。

　　四、考量性价比与长期维护

　　- 成本效益分析

　　- 高性能柱：虽单价高，但寿命长、分离效率高，适合高频次检测；

　　- 试用机制：通过供应商提供的小样测试实际分离效果，避免盲目采购。

　　- 维护便利性设计

　　- 污染控制：选择易清洗的填料(如球形颗粒)，定期用强溶剂冲洗；

　　- 储存方式：短期停用可浸泡于醇类保存，长期闲置需干燥密封存放。

　　五、规避常见误区

　　- 拒绝“唯品牌论”：国产柱在某些领域已实现进口替代，需对比参数而非单纯看产地；

　　- 警惕“一柱通用”陷阱：同类型柱(如C18)因键合工艺差异可能导致截然不同的结果，必须针对性筛选。